Подсчет количества лейкоцитов и тромбоцитов

Факторы, влияющие на правильность исследования лейкоцитов

-  криоглобулинемия

-   парапротеинемия

-   нормобласты

-   агрегаты тромбоцитов

-   нелизированные эритроциты

-   длительное хранение крови при комнатной температуре

Нормы содержания лейкоцитов в крови

Возраст                                Количество лейкоцитов

-  1 день                           11.6 - 22.0

-  1 неделя                         8.1.- 14.3

-  1 месяц                          7.6 – 12.4

-  1 год                               6.8 -  11.0

-  Взрослые                       4.0 –   9.0

Методы определения количества лейкоцитов в крови.

-  Подсчет количества лейкоцитов в счетной камере

-  Подсчет лейкоцитов в гематологических анализаторах

Определение количества лейкоцитов в счетной камере.

-  Подсчет лейкоцитов под микроскопом проводят после лизирования эритроцитов в 100 больших квадратах счетной сетки и пересчитывают на 1 л крови, исходя из объема квадратов и разведения крови. Подсчет лейкоцитов должен быть произведен в течение 2-4 ч после взятия крови.

-  При наличии в периферической крови ядросодержащих клеток красного ряд, они не лизируются и подсчитываются вместе с лейкоцитами. В этом случае, чтобы определить истинное количество лейкоцитов, из общего числа посчитанных клеток вычитают количество клеток красного ряда.

-  Например: Общее количество лейкоцитов при подсчете в камере (или на анализаторе) -45х109/л . При подсчете лейкоцитарной формулы найдено, что на 100 лейкоцитов присутствует 50 эритробластов (нормобластов).

Рассчитываем истинное количество лейкоцитов   в крови:

                150 клеток                                           -              45 х 109/л

                100 клеток (лейкоциты)              -             X

                               Х =100*45*10/л /150 = 30*10/л

                               Таким образом, истинное число лейкоцитов в  крови составляет 30 х109/л.

Основные источники ошибок при подсчете лейкоцитов в камере:

-  Неправильное соотношение объемов крови и уксусной кислоты, взятых в пробирку.

-  Неправильно подготовленный раствор уксусной кислоты (при концентрации большей, чем  5%, часть лейкоцитов может лизироваться, что приведет к занижению результата).

-  Длительное нахождение пробы при температуре выше 28°С, что может ускорить лизис лейкоцитов в образце и привести к занижению результата.

-  Неправильное заполнение камеры Горяева. Как и при подсчете эритроцитов, камеру необходимо оставлять на 1 минуту для оседания клеток.

-  Недостаточно хорошо отмытая после предыдущего определения камера Горяева. Оставшиеся в камере лейкоциты могут завышать результаты анализа.

Методы подсчета тромбоцитов

-  в счетной камере

-  мазках крови

-  гематологическом анализаторе

 Каждая группа методов имеет преимущества и недостатки.

-  Подсчет тромбоцитов в камере достаточно точен, не требует для расчета количества эритроцитов. С другой стороны этот метод более трудоемкий, поскольку тромбоциты в нативном  виде представлены мелкими и плохо контрастированными элементами. Недостаток метода - подсчет тромбоцитов в ближайшие часы после взятия крови.

-  Определение количества тромбоцитов в мазках крови значительно уступает по своей точности камерному методу или автоматическим счетчикам. Ошибки при подсчете в мазках крови могут быть обусловлены плохим качеством мазка и связанным с этим неравномерным распределением тромбоцитов, неточным определением количества эритроцитов крови. Существенное  неудобство метода - необходимость одновременного подсчета тромбоцитов и эритроцитов в крови. Преимущество его - возможность исследования тромбоцитов в любое время, независимо от момента взятия крови.

-  Метод определения тромбоцитов с помощью гематологического анализатора позволяет достаточно точно определить количество тромбоцитов, их средний объем и распределение по объему.